蛋白纯化步骤(在蛋白纯化中生物缓冲液有什么优势?)
时间:2022-04-14 10:24:01
蛋白纯化步骤(在蛋白纯化中生物缓冲液有什么优势?)
蛋白质的结构和功能需要在合适的pH值环境中才能维持,因此在蛋白的制备及纯化过程中,生物缓冲液的选择非常重要,只有合适的缓冲液才能保证蛋白的活性和结构稳定。
蛋白纯化过程缓冲液作用
用于蛋白纯化的缓冲剂有很多种,在维持体系的pH同时,要保证蛋白在纯化过程中不能失活,或者是尽量减少蛋白失活的量,在蛋白纯化的每一个步骤中都要保持蛋白的可溶性和活性。
蛋白纯化缓冲液要求
蛋白纯化过程中的缓冲液既要防止蛋白降解,也要防止蛋白聚合,其对实验结果影响显著。在选择和试剂缓冲液时应考虑以下几个因素:pH值、缓冲体系、盐离子、还原剂和稳定剂。其中每一个因素都要根据所纯化的目标蛋白进行优化,并以目标蛋白的活性作为优化的评估标准。
了解蛋白稳定性条件
蛋白的种类很多,不同的蛋白适应的pH值有差异,需根据其最适pH值来选择缓冲液。很多时候采用的是pH是7.4,这是模仿的生物条件,大多数蛋白在这个pH值下是稳定的。不过也有一些是例外的,这就需要调整pH值,以保持蛋白是可溶的且不会降解。
蛋白纯化常用的缓冲剂
蛋白纯化过程中常用的缓冲液有Tris、Tricine、Bis-Tris、MOPS等,其中普遍的是用Tris,它的缓冲范围接近生理pH值,且有着较低的离子强度,是蛋白质的良好溶剂,能保证蛋白的稳定性。需注意的是配制缓冲液时,尽量避开目标蛋白的等电点pl。因为蛋白在其等电点的pH溶液中表面没有静电荷,带百分子间排斥力减小,容易聚集,溶解度降低。
现在需纯化的蛋白的适应pH值、等电点、以及缓冲液的缓冲范围都是可以查到的,直接按对应要求匹配即可。
最新文章
- 1bat的大数据(BAT的大数据来源)
- 2三星s8屏幕上端2(三星s8屏幕上端2个按键)
- 3三星屏幕坏了如何导出(三星屏幕摔坏了如何导出数据么)
- 4红米3x怎么关闭自动更新(红米k40s怎么关闭自动更新)
- 5微信上防止app自动下载软件怎么办(微信上防止app自动下载软件怎么办啊)
- 6押镖多少钱(押镖一个月有多少储备金)
- 7瑞星个人防火墙胡功能(瑞星个人防火墙协议类型有哪些)
- 8cf现在等级是多少(cf等级2020最新)
- 9老滑头多少条鱼(钓鱼老滑头有什么用)
- 10WPS自动调整语法(wps如何修改语法)
- 11dell控制面板防火墙(dell的防火墙怎么关闭)
- 12丑女技能升多少(丑女技能需要满级吗)
- 13智能家居系统怎么样(智能家居系统好吗)
- 14戴尔屏幕(戴尔屏幕闪烁)
- 15y85屏幕信息(vivoy85息屏显示时间怎么设置)
- 16魅蓝note3屏幕出现方格(魅蓝note屏幕竖条纹)
- 17v8手指按屏幕(触屏手指)
- 18金为液晶广告机(液晶广告机lb420)
- 19三星显示器怎么校色(三星显示器 调色)
- 20hkc显示器dvi音频(hkc显示器有音响么)
- 21康佳液晶智能电视机(康佳液晶智能电视机怎么样)
- 22做液晶画板电脑(做液晶画板电脑怎么操作)
- 23液晶屏极化现象原理(液晶屏极化现象原理是什么)
- 24企业网络安全防火墙(企业网络防护)
- 256splus黑屏屏幕不亮(苹果6s plus屏幕突然黑屏)
- 26充电导致屏幕失灵(充电导致屏幕失灵怎么办)
- 27超极本屏幕旋转(笔记本电脑屏幕旋转,怎么转过来?)
- 28igmp防火墙(防火墙配置ipv6)
- 29荣耀王者多少经验(王者荣耀经验多少一级)
- 30lol老将还剩多少(qg老将)